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技術(shù)文章

灌流培養(yǎng) | 細(xì)胞截留新選擇

更新時間:2025-02-20 瀏覽次數(shù):84




灌 流 培 養(yǎng) 



灌流培養(yǎng)是指通過不斷添加新鮮培養(yǎng)基來滿足細(xì)胞生長代謝對營養(yǎng)物質(zhì)的需要,同時移除含有代謝產(chǎn)物的舊培養(yǎng)基以減少代謝產(chǎn)物對細(xì)胞生長的影響,從而維持理想的細(xì)胞生長環(huán)境。與傳統(tǒng)的批次培養(yǎng)、補料批次培養(yǎng)工藝相比,灌流培養(yǎng)工藝可以提高細(xì)胞密度及活率,延長細(xì)胞的培養(yǎng)時間,獲得更高的產(chǎn)量。對于性質(zhì)不穩(wěn)定的產(chǎn)品,灌流培養(yǎng)可以及時收獲產(chǎn)物,更展現(xiàn)出其優(yōu)勢。


圖片1.png


灌流培養(yǎng)技術(shù)雖然早在上世紀(jì)80年代就已出現(xiàn),但由于工藝比較復(fù)雜,細(xì)胞截留方法的限制以及灌流培養(yǎng)基不完善,灌流工藝并未得到廣泛應(yīng)用。目前補料批次培養(yǎng)工藝仍是主流,但隨著競爭的日益激烈,傳統(tǒng)的培養(yǎng)工藝已經(jīng)漸漸無法滿足生產(chǎn)的要求,為了降低成本以及操作規(guī)模,提高設(shè)備的產(chǎn)量以及利用率,灌流培養(yǎng)正在逐漸吸引人們的目光。


灌流培養(yǎng)沒有大量應(yīng)用的其中一個重要原因就是細(xì)胞截留方法的限制。目前的細(xì)胞截留裝置主要是基于過濾、重力沉降、超聲、離心等原理設(shè)計的。雖然隨著灌流培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展,細(xì)胞截留設(shè)備也同樣經(jīng)歷著不斷的改變與創(chuàng)新,但考慮到截留效率、可放大性等因素,可選的細(xì)胞截留裝置仍不多。


膜過濾技術(shù)基本是目前可以選擇的方式,但膜過濾技術(shù)有很多缺點,諸如:細(xì)胞截留過程中會產(chǎn)生剪切力影響細(xì)胞活性、隨著培養(yǎng)時長延長會出現(xiàn)膜污染堵塞現(xiàn)象等。對于大規(guī)模的灌流培養(yǎng),使用過濾方法截留細(xì)胞,通常需要額外準(zhǔn)備備用過濾截留膜柱,以防止堵塞而造成灌流培養(yǎng)無法繼續(xù)進行。使用過濾截留細(xì)胞做灌流培養(yǎng)經(jīng)常會被這些問題困擾,簡直不勝其煩。但現(xiàn)在我們有了一種新的選擇:聲學(xué)細(xì)胞截留裝置,它沒有剪切力和膜堵塞問題,從實驗室規(guī)模到生產(chǎn)規(guī)模均可使用。





聲學(xué)細(xì)胞截留裝置 


聲學(xué)細(xì)胞截留裝置的原理是:在截留腔內(nèi)通過超聲波疊加形成駐波,駐波把細(xì)胞聚集成松散的細(xì)胞團塊,團塊在重力作用下快速沉降與上清分離,然后上清被抽走,松散的細(xì)胞團塊重新輸回到反應(yīng)器打散繼續(xù)培養(yǎng)。因為是基于駐波和重力沉降的原理,整個過程中不用膜系統(tǒng),所以沒有剪切力和膜污染堵塞的問題。另外,細(xì)胞截留的諧振腔是可以進行濕熱滅菌或SIP滅菌重復(fù)使用,在一定程度上攤平前期投入成本。



圖片2.png

細(xì)胞在駐波中聚集成條帶,在重力作用下快速沉降


雖然聲學(xué)細(xì)胞沉降裝置有很多優(yōu)點,但因為之前的設(shè)備截留效率低的問題,其僅限于實驗室規(guī)模使用。不過,最近由生物反應(yīng)器生產(chǎn)商Applikon推出了灌流速率可達上千升每天的聲學(xué)細(xì)胞截留裝置Applikon BioSep,它實現(xiàn)了在大規(guī)模灌流培養(yǎng)中使用聲學(xué)細(xì)胞截留裝置。當(dāng)前已經(jīng)有少數(shù)企業(yè)在生產(chǎn)中使用Applikon BioSep。


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不同規(guī)格BioSep圖片

Applikon BioSep系統(tǒng)有1L/天、10 L/天、50 L/天、200 L/天和 1000 L/天型號可供選擇,能夠兼容任何品牌的生物反應(yīng)器。其中,50 L/天和200 L/天及以上的型號,可提供cGMP規(guī)范所需的驗證文檔和服務(wù)。

圖片6.png

不同規(guī)格BioSep參數(shù)


廣州東銳科技有限公司是Applikon在廣東省、海南省的總代理商,提供各種型號規(guī)格的Applikon硬件和售后服務(wù),助力您的細(xì)胞和微生物培養(yǎng)。如需咨詢產(chǎn)品請聯(lián)系我們。





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